由第四圖之結果可知第二裸鼠腫瘤組織中的血紅素濃度較第一組裸鼠降低70%,並且,相較於第三組裸鼠來說,亦降低29%。 由此結果可推知本發明所揭抹草萃取物係具有阻斷腫瘤血管新生之能力,而能夠達到減緩乳癌惡化或是避免乳癌復發之功效。 根據衛生福利部資料顯示,乳癌發生率在臺灣逐年上升,為女性癌症死亡的第二大原因,且為西方國家女性普遍的疾病之一。 乳癌通常發生在乳房腺上皮組織,當乳腺細胞發生病變並變成腫瘤時,即屬於乳腺癌,而乳癌的特徵包括乳房腫塊或形狀改變、乳頭分泌物、皮膚凹陷、皮膚出現紅色鱗屑狀斑塊等。
- 第十六圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞於G0/G1 時期之細胞數量比率。
- 第十二圖係為統計分析經不同濃度之抹草萃取物處理的斑馬魚之血管分支數量的結果。
- 第十四圖係為H184B5F5/ M10細胞以不同濃度之抹草萃取物進行培養後之結果。
- 在一實施例中,玻片56係由玻璃製成且具有約一英寸之寬度、約三英寸之長度、及約0.04英寸之厚度。
- 由第九圖之結果可知,相較於第一組或第三組來說,投予本發明所揭抹草萃取物之第二組裸鼠腫瘤組織內之Bax/Bcl-2、caspase3 及CAD 蛋白表現量皆明顯上升,分別較第一組增加約29%、19%及42%,顯示本發明所揭抹草萃取物能夠促進腫瘤細胞凋亡。
- 頂舉銷38b與其槽孔36相互作用,以使玻片固持器33在其平面內的滑動降至最低程度。
將控制真空施加至該樣品收集器,以通過其篩網過濾器抽吸流體,直至緊靠該過濾器收集到所需數量及空間分佈之細胞。 乳頭分泌物2023 此後,自該樣品容器移出該樣品收集器,並將過濾器部份按壓在載玻片上,以將所關注之顆粒以實質上與收集時相同之空間分佈轉移至該玻片上。 某些用於在玻片上產生有利於目視檢查之薄單層細胞的方法及裝置係揭示於美國專利案第5,143,627、5,240,606、5,269,918、5,282,978、6,572,824、6,562,299及7,579,190號中。 依據申請專利範圍第1或2項所述用途,其中,該抹草萃取物係能夠抑制下列至少一蛋白表現:cyclinD1、cyclinE、E2F、cdk2、cdk4、p-Rb/Rb、Bcl-2。
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由上述結果可知,本發明所揭抹草萃取物係具有調控活體內腫瘤細胞生長週期停滯相關分子表現,以抑制腫瘤增生,進而達到治療癌症之功效。 在步驟114中,鬆開閂鎖58且藉由對翼片34手工施加壓力,使第二定位構件32自第一位置旋轉至第二位置,以使 玻片56與薄膜28之外緣40進行有限的初始接觸。 乳頭分泌物2023 在步驟116中,藉由對翼片34手工施加壓力使第二定位構件32自第二位置旋轉至第三位置。
以不同濃度之抹草萃取物:0、100、250μg/mL處理MCF-7 細胞反應0、24和48 乳頭分泌物2023 小時後,進一步以流式細胞儀分析抹草萃取物在不同時間點之細胞週期性變化,結果如第十七圖所示。 將受精16小時後的斑馬魚卵用Pronase 酵素液(2 mg/mL 溶於一次水)進行破殼,置於37℃溫箱反應4至8分鐘(每兩分鐘觀察一次),以一次水終止反應,製造水流使卵殼浮起並吸除,放回28℃培養箱24 小時後,隨機分為5 組。 分別加入不同濃度之本發明所揭抹草萃取物做處理,濃度分別為0、100、200、500、1000 μg/mL,放置於28℃恆溫培養箱中生長24小時後,再進行後續分析。
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由第十六圖C之結果可知,當抹草萃取物於濃度為250 以及500 μg/mL時,對於MCF-7 細胞之生長確實有明顯之抑制作用。 更進一步來說,於抹草萃取物濃度為250 或500 μg/mL,於24或48小時之細胞生長曲線街不再生長。 如同前述實例中所述,將MCF-7 乳頭分泌物 細胞經由不同濃度之抹草萃取物處理24 小時後,以流式細胞儀分析各個細胞週期之分佈情形,並進行量化,結果如第十六圖所示。 乳頭分泌物2023 如請求項21之裝置,其中該玻片固持器係藉由一或多個可旋轉連接構件連接至該手柄之延伸部份,該等構件係經組態以使該玻片固持器可自該圓柱體旋離,而利於使用該圓柱體。
在另一實施例中,用於製備樣本玻片之手持裝置包括手柄、過濾器固持器組件、及玻片固持器組件。 該過濾器固持 器組件係附接至該手柄之延伸部份,且包括中心軸及圍繞該中心軸放置且可滑動連接至該中心軸之往復式圓柱體。 該玻片固持器組件在與該過濾器固持器組件相隔之位置附接至該手柄之延伸部份,且包括複數個樞軸連接(例如經鉸鏈連接)之定位構件及可移動連接至該等定位構件中相對於該延伸部份最遠之一者的玻片固持器。 該等定位構件之可移動連接允許該玻片固持器自該過濾器固持器組件上之圓柱體旋離,以利於使用該圓柱體,例如,用於替換固定於該圓柱體構件上之過濾器。 該等定位構件之可移動連接亦允許固定在該玻片固持器中之玻片與固定於該圓柱體上之過濾器薄膜進行滾動接觸。 在一該實施例中,該過濾器固持器組件之圓柱體具有相對於該延伸部份之近端及遠端,及位於該近端之凸緣。
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斑馬魚胚胎經不同濃度抹草萃取物處理24 小時後,利用福馬林固定後犧牲,藉由解剖顯微鏡可觀察並記錄血管分支之數量,結果如第十一圖及第十二圖所示。 如第五圖所示,在H&E染色下,第一組裸鼠之的組織切片型態呈現MCF-7 細胞浸潤瀰漫的特性,而第二組及第三組裸鼠之組織則呈現現結節狀,顯示投予本發明所揭抹草萃取物或是藥物tamoxifen都會使癌細胞惡性度降低而不會擴散增生。 值得注意的是,乳頭若出現血色、淺黃色異常分泌物,並不代表就是罹乳癌,有可能是良性的乳管內乳突瘤。
由第十九圖A至第十九圖D可知,隨著抹草萃取物濃度上升至250μg/mL,可促使MCF-7 細胞中Rb/E2F 複合體 表現量增加24%、cyclin D1/cdk4 以及cyclin E/cdk2 之結合表現則分別下降26%以及32%。 由第十一圖及第十二圖之結果可知,與濃度為0 g/mL之抹草萃取物相比,血管分支數目隨著抹草萃取物濃度之增加而減少。 乳頭分泌物 具體來說,相較於濃度為0 g/mL之抹草萃取物,當抹草萃取物濃度為100 g/mL,血管新生數量下降43%,而當抹草萃取物濃度為200 g/mL,血管新生數量下降50%以上,而能夠有效抑制血管新生。 由第一圖之結果顯示投予本發明所揭抹草萃取物係能夠不影響個體成長發育,維持體重之增加及營養吸收之能力。 而由第一圖之結果可知,第二組裸鼠體重逐漸增加,於第14天時,其體重較第0天增加3g,且持續餵食投予抹草萃取物至第28天時,體重已增加7g;第三組裸鼠之體重卻隨著投予時間越長而下降。
乳頭分泌物: 延伸閱讀
第十九圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞,其內Rb/E2F 複合體之表現。 第十九圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞,其內cyclin D1/cdk4之表現。 第十九圖C係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞,其內cyclin E/cdk2之表現。 第二十圖A係以annexin V-PE apoptosis assay 分析經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞之早期細胞凋亡表現。
- 可將過濾器轉移裝置之各種元件(如經程式化以將單層受關注顆粒自懸浮於流體中之樣本收集至過濾器30之薄膜28上的真空裝置及控制微處理器)作為樣本玻片製備裝置10之部份置於手柄12的內部。
- 至於乳突瘤、乳癌、乳腺炎等問題,常是造成單側、單孔、量多、血色或黃綠色的異常分泌物。
- 將該等細胞樣本置於溶液中,隨後收集並轉移至載玻片上,以在放大倍率下觀察。
- 該第一位置及第三位置係行程終端位置,而該第二位置係中間位置。
在該實施例中,該過濾器固持器組件在與該把手部份自該延伸部份延伸之方向大約相同的方向上自該手柄之延伸部份延伸。 第六圖係為分析各組裸鼠腫瘤組織中細胞增生蛋白PCNA表現量之結果。 第七圖係為分析各組裸鼠腫瘤組織中促凋亡蛋白(apoptotic body)表現量之結果。 第八圖係為檢測與細胞週期分子相關蛋白之表現及將之進行統計分析之結果。 第九圖係為檢測與細胞凋亡相關蛋白之表現及將之進行統計分析之結果。 第十圖係為分析經不同濃度之抹草萃取物處理的斑馬魚,其致死率及心跳變異率之結果。
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因為收集用於分析之細胞樣本通常比傳統的外科病理學步驟(如活組織檢查)創傷性小,所以廣泛地使用細胞技術,藉此使用具有彈簧負載型可轉移探針、固定套管及類似物之專用活組織檢查用針,自患者切除組織樣本。 可藉由各種技術自患者獲得細胞樣本,包括(例如)藉由刮擦或擦拭某區域,或藉由使用針自胸腔、膀胱、椎管、或其他適當的區域吸出體液。 將該等細胞樣本置於溶液中,隨後收集並轉移至載玻片上,以在放大倍率下觀察。 可在該載玻片上之細胞上塗覆固定劑及染色溶液,以為存檔目的及便於檢查而保存樣本。
第十四圖係為H184B5F5/ M10細胞以不同濃度之抹草萃取物進行培養後之結果。 第十五圖係顯示MCF-7細胞及H184B5F5/ M10細胞分別以不同濃度之抹草萃取物培養後之細胞存活率。 第十六圖A係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞,以流式細胞儀分析各個細胞週期之結果。 第十六圖B係顯示經由不同濃度之抹草萃取物處理之MCF-7 細胞於G0/G1 時期之細胞數量比率。